近場光學(xué)顯微鏡是一種精密的光學(xué)儀器,已有300多年的發(fā)展史。自從有了顯微鏡,人們看到了過去看不到的許多微小生物和構(gòu)成生物的基本單元——細(xì)胞。不僅有能放大千余倍的光學(xué)顯微鏡,而且有放大幾十萬倍的電子顯微鏡,使我們對生物體的生命活動規(guī)律有了更進(jìn)一步的認(rèn)識。近場光學(xué)顯微鏡在普通中學(xué)生物教學(xué)大綱中規(guī)定的實驗中,大部分要通過顯微鏡來完成,因此,顯微鏡性能的好壞是做好觀察實驗的關(guān)鍵。
近場光學(xué)顯微鏡使用方法
1.使用單筒顯微鏡時,要養(yǎng)成用左眼觀察的習(xí)慣(因一般用右手畫圖),觀察時要兩眼同時睜開,不要睜一只閉一只,因為這樣易于疲勞。為了訓(xùn)練學(xué)生習(xí)慣于兩眼同時睜開觀察,可剪一塊長約14cm,寬約6cm的長方形硬紙片,在靠近左端處挖一個直徑比鏡筒上端外徑略小的圓孔,把圓孔套在鏡筒上段,觀察時兩眼同時睜開,利用紙片的右端擋住右眼的視線,這樣訓(xùn)練一段時間后,就能習(xí)慣于兩眼同時睜開,然后把紙片去掉。
2.直筒顯微鏡的鏡臂與鏡座連接處,是一個機械關(guān)節(jié),可用于調(diào)節(jié)鏡筒的傾斜度,便于觀察,鏡臂不能過于后傾,一般不超過40°。但是在使用臨時裝片觀察時,禁止使用傾斜關(guān)節(jié)(當(dāng)鏡筒傾斜時,載物臺也隨之傾斜,載玻片上的液體易流出),尤其是裝片內(nèi)含酸性試劑時嚴(yán)禁使用,以免污損鏡體。
3.目鏡和物鏡的使用
一般都是用一個放大倍數(shù)適中的目鏡(10×)和zui低倍的物鏡開始觀察,逐步改用倍數(shù)較高的物鏡,從中找到符合實驗要求的放大倍數(shù)。
轉(zhuǎn)換物鏡時,先用低倍鏡觀察,調(diào)節(jié)到正確的工作距離(成像zui清晰)。如果進(jìn)一步使用高倍物鏡觀察,應(yīng)在轉(zhuǎn)換高倍物鏡之前,把物像中需要放大觀察的部分移至視野中央(將低倍物鏡轉(zhuǎn)換成高倍物鏡觀察時,視野中的物像范圍縮小了很多)。低倍物鏡和高倍物鏡基本齊焦(同高調(diào)焦)。
通常認(rèn)為,使用任何一個物鏡時,有效放大倍數(shù)的上限是1,000乘它的數(shù)值孔徑,下限是250乘它的數(shù)值孔徑。如40×物鏡的數(shù)值孔徑是0.65,則上、下限分別為:1000×0.65=650倍和250×0.65≈163倍,超過有效放大倍數(shù)上限的叫做無效放大,不能提高觀察效果。低于下限的放大倍數(shù)則人眼無法分辨,不利于觀察。一般*的放大倍數(shù)范圍是500—700乘數(shù)值孔徑之間的數(shù)字。
4.油浸物鏡的使用
近場光學(xué)顯微鏡使用油浸物鏡時,一般不要使用同高調(diào)焦。同高調(diào)焦只適用于每臺顯微鏡的原配物鏡,在使用低倍和高倍物鏡時,是一個有利的方便條件,但在使用油浸物鏡時,則受到一定限制,一般地說,用油鏡觀察未加蓋玻片的標(biāo)本片(載玻片)時,利用同高調(diào)焦的安全度較大,而對于有蓋玻片的標(biāo)本片,要小心使用,因為油浸物鏡的工作距離很短,在設(shè)計和裝配時所考慮的同高是對標(biāo)準(zhǔn)厚度蓋玻片的。