目前有些
高靈敏度雙通道光度計(jì)的生產(chǎn)廠商只測(cè)試220nm處的雜散光不測(cè)試340nm處的雜散光,這是不對(duì)的。測(cè)試220nm處雜散光的理由是:
,根據(jù)量子光學(xué)理論,波長(zhǎng)是能量的倒數(shù),波長(zhǎng)短能量大,容易產(chǎn)生雜散光,而220nm處屬于短波部分;
第二,根據(jù)儀器學(xué)理論中的電光源理論,氘燈在220nm處能量很小,即信號(hào)很小,容易顯現(xiàn)雜散光;
第三,根據(jù)儀器學(xué)理論中的光電發(fā)射理論,光電倍增管在220nm處的光譜響應(yīng)(靈敏度)低,容易顯現(xiàn)雜散光。而測(cè)試340nm處雜散光的原因是*不同的,因?yàn)?40nm處一般是氘燈換鎢燈和儀器調(diào)換濾光片的地方,此時(shí)容易產(chǎn)生雜散光。所以,對(duì)于高靈敏度雙通道光度計(jì)來(lái)講,應(yīng)該測(cè)試220nm和340nm兩處的雜散光。
高靈敏度雙通道光度計(jì)儀器設(shè)計(jì)的理論依據(jù)是比耳定律。研究的是物質(zhì)對(duì)光的吸收。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是研究物質(zhì)對(duì)平行、單色光吸收的儀器。它主要以定量分析為主,也可以進(jìn)行定性分析工作。一般用于研究(分析)物質(zhì)的含量,如對(duì)物質(zhì)的定量檢測(cè)、純度檢查等。除非常簡(jiǎn)單的化合物外,一般不能僅用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)一種儀器來(lái)決定被分析物質(zhì)的性質(zhì)。如果要做定性分析,要決定一種質(zhì)的性質(zhì)或結(jié)構(gòu),需要多種儀器(如紫外、紅外、質(zhì)譜、色譜、甚至波譜、核磁共振等)組合使用,才能做定性或結(jié)構(gòu)分析。實(shí)際上,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)儀器和原子吸收分光光度計(jì)儀器的設(shè)計(jì)理論依據(jù)是*一致的,只是儀器的結(jié)構(gòu)不同而已。
由于不同的物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)光有不同的吸收度,其吸收曲線形狀和大吸收波長(zhǎng)λmax不同;但同一種物質(zhì)即使?jié)舛炔煌?,其吸收曲線形狀仍相λmax不變。因此,根據(jù)光譜圖上吸收光譜的形狀等特征就可以進(jìn)行定性分析,吸收曲線是物質(zhì)定性的基礎(chǔ)。
但由于溶劑對(duì)電子光譜有較大的影響,且影響較為復(fù)雜。改變?nèi)軇┑臉O性,會(huì)引起吸收帶形狀的變化。例如,當(dāng)溶劑的極性由非極性改囊到極性時(shí),大多數(shù)化合物的紫外可見(jiàn)吸收光譜精細(xì)結(jié)構(gòu)消失,吸收帶變得更為平滑。改變?nèi)軇┑臉O性,還會(huì)使吸收帶的大吸收波長(zhǎng)λmax發(fā)生變化。因此,在采用紫外可見(jiàn)吸收光譜進(jìn)行定性分析時(shí),高靈敏度雙通道光度計(jì)應(yīng)注意考慮溶劑等條件。此外,由于相當(dāng)數(shù)量化合物的紫外可見(jiàn)吸收光本身的特征性了見(jiàn)分光光度計(jì)一般不單獨(dú)用于對(duì)未知化合物定性,而作為一種輔助的定性手段。